丁香屬植物組織培養的研究

      1 丁香屬植物的繁（fán）殖研究
　　本屬植物的繁殖方法很（hěn）多，有播種、扡插（chā）、嫁接、分株、壓條等，由（yóu）於其重要的觀賞性，其組織培（péi）養技術作為當今（jīn）大（dà）量擴繁（fán）的一（yī）種生物技術手段已（yǐ）經廣泛應用於繁殖（zhí）、保存和培（péi）育丁香新品種。有人對歐丁香（S.vulgaris）進行過組培研（yán）究，並在莖尖培養中獲得成功（gōng）；李容群等（děng）人研（yán）究了丁香雜交的組織（zhī）培養；劉建斌等對紫丁（dīng）香的（de）組織培養（yǎng）進行了研究，篩選出了腋芽萌生、繼代培養和生（shēng）根培（péi）養階段的適宜培養基（jī）。小葉丁香的繁（fán）殖方（fāng）法包括播種、扡插、嫁接（jiē）、分株、壓條等，已在生產（chǎn）實踐中得到廣泛應用。
　　2 丁香屬植物的器官培養
　　器官發生途徑包括直接器官發生和間接器官發生（shēng）兩種， 一般（bān）要經（jīng）過不定芽的（de）增殖、伸長和生（shēng）根（gēn）三步（bù）。丁香（xiāng）的器官培養包（bāo）括離體的莖（jīng）尖、莖段、葉片、根、種子（zǐ）等器官的無菌培養，以器官作為外植體進行離體（tǐ）培養是丁香組織培養中的主要方麵。
　　直接器官發生是指不經過愈傷組織階段， 直（zhí）接從外植體上誘導產生（shēng）不定芽或不定根的過程，通過這種方式再生的（de）植株，其遺傳穩定性較好，但是有關（guān）丁香直接器官發生的報道（dào）甚少。間接（jiē）器官發生是先從外植體上誘導出愈傷組織，然後再誘導不定芽（yá）或不定根的過程（chéng）。外植體（tǐ）的不同部位誘導所產生的愈傷組織在不同（tóng）條件下進行培養形（xíng）成的不同細（xì）胞係（xì）也有（yǒu）所不同。小葉丁香（Syringa pubescens Turcz.），將消（xiāo）毒滅菌處理（lǐ）後的外植體放入附加植物生長調節劑（PGR），並經過滅菌的培養基表麵，置於培養箱中（zhōng）進（jìn）行愈傷組織誘導，在添加有1.0 mg.L-1 KT和1.0 mg.L-1 NAA的LS培養基上，嫩葉有淺綠色愈傷組織，呈塊狀，較鬆散，觸之易（yì）碎；而用幼莖誘導產生的愈傷組織則相對較（jiào）硬並有較（jiào）深的綠色，含（hán）水量較低（dī）。 2.1 莖尖的組織培養（yǎng）
　　腋芽生枝途徑是指利用莖尖、腋芽或（huò）其分生組織培養而直接獲得1 株或1 叢試管苗的（de）增殖方法。丁香莖尖組織（zhī）培養是建立組織培養程序中一種簡單易行的方法，有關研（yán）究以紫丁香的根頸部萌生枝條為材料（liào），取其（qí）莖尖接種到4種不同的培養（yǎng）基（jī）中（MS+6-BA 1.0mg.L-1、MS+6-BA 1.0mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1、MS+6-BA 0.5mg.L-1+IAA 0.2mg.L-1、MS+6-BA 2.5mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1），14d後，莖尖的基部截斷處生出許多愈傷組織（zhī）。腋芽（yá）增殖效率比較低（dī），但是得到（dào）的植（zhí）株卻有兩個優點，即遺傳性狀比較穩定、自發變異頻率（lǜ）很低，且再生所需要的時間短、植株健壯、適應性強（qiáng）、移栽成活率高（gāo）。
　　2.2 莖段的離體（tǐ）培養
　　紫（zǐ）丁香（Syringa oblata）根頸部萌生枝，除去其頂端幼嫩部分和下部木質化較強的部分，隻（zhī）保留靠近頂端的莖段，接種到培養基MS+6-BA0.5mg.L-1+IAA0.2mg.L-1中，腋芽增（zēng）殖數和試管苗長勢均較佳。小葉丁香（Syringa microphylla Diels）又名四季丁香，以當（dāng）年萌蘖條上部幼嫩的莖段為外植體，誘導培養基為WPM+6-BA1.0mg.L-1 （單位下同）+IBA0.1，平均每個莖段長出 10～15 個芽，出芽率在（zài） 90%以上。增殖培養基（jī）用MS+6-BA1.0+IAA0.1，壯苗培養基為MS+6-BA1.0+IAA0.2，生（shēng）根（gēn）培養基則用1/2MS+NAA0.1，30d時，生根率達 100%。
　　2.3 胚（pēi）的離體培養
　　丁香幼胚培養（yǎng）的最佳胚齡為50～60d，培養的（de）最適培養基為Monnier，其次為MS和L，在培養時必須嚴格把握好培養時期，以求最高的萌發低濃度的細胞分裂素，提高幼胚（pēi）的萌發率（lǜ）和成苗率，濃度以BA 0.01 mg·L-1為好，生長素以NAA 0.01 mg·L-1為佳；對暴馬丁香（Syringa reticulatavar.mandshurica）的無性繁（fán）殖研究以（yǐ）暴馬丁香的下胚軸作（zuò）為外植體，芽誘導培（péi）養基為MS+6-BA 5mg.L-1（單位下同）+IBA 0.05-0.5，每個外植體上即（jí）形成5～6株無菌小苗；（www.znjjhypt.com）增殖培養基為MS+6-BA 5+IBA 0.1，繼代3次後，增（zēng）殖能力並沒有（yǒu）下降；生根培養基為1/2MS+IBA 1，生根率（lǜ）達（dá）100%。
　　3 懸浮細胞培養
　　在植物（wù）組織（zhī）培養（yǎng）研究中，發現（xiàn）培養細胞中含有各種特（tè）殊的代謝（xiè）產物，如藥用（yòng）成（chéng）分、飲料、色素、香精等，其中有些是微生物或人工不能合成的，因此，可（kě）用大規模細胞培（péi）養來生產這些有用產物，使大田農業生產走向工廠化生產。選擇小葉丁香（Syringa pubescens Turcz.）的葉、莖、芽為外植體（tǐ），在MS和LS等培養基上進（jìn）行愈傷組織誘（yòu）導與培養，並在繼代3次以後轉入懸浮細胞培（péi）養，測定懸浮培養的細胞生長周期，首次建立了小葉丁香的懸浮細胞培養體係。
　　丁香的景觀價值和經濟價值日益受到人們（men）的重視，建立有效的丁香離體培養係統不僅對該優良品係（xì）無性繁殖有意義，而（ér）且也是對其進行遺傳改良和細胞（bāo）生物學研究的基礎。丁香的組織培養在（zài）以下幾個方麵值得深入研究（jiū）：研究體細胞胚的誘導及人工種子的製作；探索原（yuán）生質體培養與雜交技術；利用組織培養與誘變處理篩選各種不同抗性材料；研究高頻遺傳轉化技術（shù）。
　　我們應重視丁香組織培養的基礎研究，不斷完善丁香組（zǔ）織的培養技術，充分發揮其在生理（lǐ）、遺傳、細胞等研（yán）究中的（de）基礎作用。
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　　作者簡介：
　　焦豔紅（hóng），1978年2月出生，本科學曆，研（yán）究方向林業科技（jì），林業技術等